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【本資訊由中國糧油儀器網(wǎng)提供】糖果—還原糖的測定

　　1.直接滴定法

　　2 原理

　　樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，直接滴定標定過的堿性酒石酸銅液，以次甲基藍作指示劑，根據(jù)樣品液消耗體積，計算還原糖量。

　　3 試劑

　　3.1 堿性酒石酸銅甲液

　　稱取15g硫酸銅（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基藍，溶于水中并稀釋至1000mL。

　　3.2 堿性酒石酸銅乙液

　　稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶于水中，再加入4g亞鐵氰化鉀，完全溶解后，用水稀釋至1000mL，貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。

　　3.3 乙酸鋅溶液

　　稱取21.9g乙酸鋅，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀釋至100mL。

　　3.4 亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）

　　稱取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至100mL。

　　3.5 葡萄糖標準溶液（1mg/mL）

　　精密稱取1.000g經(jīng)過98～100℃干燥至恒量的純葡萄糖，加水溶解后加入5mL鹽酸，并以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當于1mg葡萄糖。

　　3.6 鹽酸

　　4 儀器

　　4.1 實驗室常規(guī)儀器和設備

　　4.2 古氏坩堝或G4垂融坩堝

　　5 操作步驟

　　5.1 樣品處理

　　將樣品搗碎混勻待用，樣品應避免暴露在空氣和陽光下，并盡可能迅速地進行分析。

　　稱取約2.5～5g樣品，置于250mL容量瓶中，加50 mL水，搖勻后慢慢加入乙酸鋅溶液5mL及亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混勻。靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。

　　5.2 標定堿性酒石酸銅溶液

　　吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9mL葡萄糖標準溶液，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體積，同時平行操作三份，取其平均值，計算每10mL（甲、乙液各5mL）堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖的質(zhì)量（mg）。

　　5.3 樣品溶液預測

　　吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以先快后慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時，以每兩秒1滴的速度滴定，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積。

　　5.4 樣品溶液測定 1

　　吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預測體積少1mL的樣品溶液，使在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸繼續(xù)以每兩秒1滴的速度滴定，直至藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗體積。

　　6 結(jié)果計算

　　按下式計算糖果中還原糖的含量： 100100025021×××=VmmX

　　式中：X—樣品中還原糖的含量（以葡萄糖計），%；

　　m1—10mL堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各5mL）相當于還原糖（以葡萄糖計）的質(zhì)量，mg；

　　m2—樣品質(zhì)量，g；

　　V—測定時平均消耗樣品溶液體積，mL。

　　7 精密度

　　同一樣品兩次平行測定值相對差不得超過15%。