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水稻葉綠素含量的簡(jiǎn)易測(cè)定

來(lái)源: 本站  類別:實(shí)用技術(shù)  更新時(shí)間:2010-06-10  閱讀
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水稻葉綠素含量的簡(jiǎn)易測(cè)定
水稻葉綠素含量直接影響光合作用強(qiáng)度,并與氮素營(yíng)養(yǎng)有密切關(guān)系。了解與控制葉綠素含量,對(duì)提高植物的產(chǎn)量有一定意義。自從Mackinney (1941) 建立的提取和測(cè)定葉綠素含量的方法以來(lái), 直至Hiscox (1979)等用二甲亞礬(DMSO) 直接浸泡測(cè)定高等植物葉綠素含量〔1〕,還有陳福明〔2〕、張憲政〔3〕等人提出了丙酮乙醇水混合液法, 但上述測(cè)定方法還存在煩瑣的弊病。為此,我們進(jìn)行了一些改進(jìn),測(cè)試方法簡(jiǎn)便易行。當(dāng)然測(cè)定葉綠素含量還有更為簡(jiǎn)單的方法,即直接使用儀器來(lái)測(cè)定。市面上測(cè)定葉綠素的儀器通常有手持葉綠素儀、葉綠素測(cè)定儀、SPAD502葉綠素儀。
1  測(cè)定方法和步驟
  在水稻各生育時(shí)期自上而下取三片葉,用剪刀剪碎(長(zhǎng)1 cm 以下) ,各處理分別稱2 g 鮮重,放入帶塞的三角瓶中,并分別用95 %乙醇和80 %丙酮作為浸提液,將浸提液小心傾入100 ml 容量瓶中,定容至100 ml 。搖勻后, 吸5 ml 該液于50 ml 容量瓶中, 用95 %乙醇和80 %丙酮分別定容至50 ml ,然后用分光光度計(jì)比色測(cè)定。
2  結(jié)果
2. 1  不同有機(jī)溶劑浸提葉綠素含量的比較 由表1 看出,用95 %乙醇作為浸提液,測(cè)得的葉綠素含量在所有處理中均比用80 %丙酮作浸提液的高。其差值平均為0. 274 ±0. 204 ,平均高13. 10 %。說(shuō)明用95 %乙醇浸提效果比80 %丙酮的好。
2. 2  葉綠素浸提母液降解速率的對(duì)比 據(jù)前人報(bào)道,葉綠素浸提液在光照條件下會(huì)迅速降解,其速率比在黑暗條件下要高10 倍之多〔4 ,5〕。為此, 我們對(duì)暗保存下的葉綠素浸提液降解速率進(jìn)行了分析統(tǒng)計(jì),結(jié)果表明:保存一天的降解速率為0. 46 ±2. 218 %, 差異不顯著;保存一星期的降解速率為14. 0 ±2. 446 %(見(jiàn)表2 、3) 。
3  小結(jié)
3. 1  試驗(yàn)結(jié)果表明, 水稻葉綠素含量的測(cè)定以選用95 %乙醇作為浸提液比用80 %丙酮效果較好。浸提時(shí)間以8 h 以上為宜,24 h 更徹底。秈稻一般比粳稻較易提取,浸提時(shí)間可縮短在8 h 內(nèi)。粳稻浸提時(shí)間可略加長(zhǎng)。
3. 2  在暗保存下,葉綠素浸提母液降解速度一天內(nèi)差異不顯著,一星期降解速率為14. 0 ±2. 446 %。這對(duì)在實(shí)際工作中、在儀器發(fā)生故障的情況下采取應(yīng)變措施是有參考意義的。
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