實(shí)驗(yàn)對(duì)油菜籽葉綠素的檢測(cè)
油菜籽是草本十字花科作物,是我國(guó)主要油料作物和蜜源作物之一,其籽粒是制浸油脂原料主要品種之一。我國(guó)是世界油菜生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó),油菜為我國(guó)第一大植物油源,我國(guó)年均油菜面積和總產(chǎn)居世界首位。
菜籽中的葉綠素含量高低直接影響菜籽油品質(zhì)和加工成本,因此日益受到育種家及油脂加工行業(yè)的重視。日本、加拿大、澳大利亞等國(guó)已將油菜籽中葉綠素的含量作為油菜籽分等分級(jí)的重要技術(shù)依據(jù)。
菜籽葉綠素含量高,高溫高濕加工時(shí)形成脫鎂葉綠素,一方面會(huì)使菜籽油色澤加深,呈墨綠色,影響菜籽油外觀品質(zhì),加工過(guò)程中脫色脫嗅工藝越復(fù)雜,加工成本越高;另一方面它是一種光敏劑,能引發(fā)自由基反應(yīng),促進(jìn)油脂氧化反應(yīng),導(dǎo)致油脂酸敗變質(zhì),穩(wěn)定性大為降低,極大縮短了產(chǎn)品貨架期。因此研究建立適合我國(guó)國(guó)情并與國(guó)際接軌的油菜籽葉綠素測(cè)定技術(shù)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
實(shí)驗(yàn)在對(duì)油菜籽中葉綠素的提取試劑、提取技術(shù)、檢測(cè)儀器(例如葉綠素檢測(cè)儀)條件等進(jìn)行了研究,建立了混合溶劑研磨提取,多波長(zhǎng)分光光度法檢測(cè)油菜籽葉綠素的方法,并利用所建立的方法,對(duì)2004-2006年全國(guó)油菜品質(zhì)普查樣品以及國(guó)外收集樣品進(jìn)行了葉綠素含量的測(cè)定,主要研究結(jié)果如下:
1.通過(guò)對(duì)油菜籽葉綠素提取方式,樣品的研磨細(xì)度、提取試劑、提取方式、提取時(shí)間、提取溫度等提取條件及提取過(guò)程中葉綠素穩(wěn)定性的系統(tǒng)研究,建立了溶劑研磨-紫外可見(jiàn)光譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定油菜籽中葉綠素含量的檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)方法。即樣品研磨細(xì)度40目后,石油醚+無(wú)水乙醇混合溶劑提取葉綠素,專用不銹鋼制提取管加入研磨鋼珠,水平搖床震蕩提取1小時(shí),中速定性濾紙濾,625nm、665nm、705nm分光光度計(jì)多波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值,計(jì)算葉綠素含量。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,葉綠素a的重現(xiàn)性(RSD)分別為1.62%,檢出限(3d)為0.155mg/L,回收率為94.4~98.0%,本方法已經(jīng)作為農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)頒布:NY/T1287-2007《油菜籽中葉綠素含量的測(cè)定(光度法)》,為油菜籽中葉綠素含量測(cè)定的提供了科學(xué)的依據(jù)。
2.采用所建立的標(biāo)準(zhǔn)方法,對(duì)我國(guó)油菜主產(chǎn)區(qū)征集的120份油菜籽樣品、加拿大、澳大利亞等油菜主產(chǎn)國(guó)征集的26油菜籽進(jìn)行了檢測(cè),分析比較了我國(guó)不同種植區(qū)域、不同種皮顏色、國(guó)內(nèi)外不同收獲年份的油菜籽樣品葉綠素含量,初步探明了油菜籽葉綠素含量分布與差異,冬油菜葉綠素含量1~10mg/kg,明顯低于春油菜葉綠素含量10~40mg/kg;品種的種皮顏色對(duì)葉綠素影響不大;而我國(guó)菜籽葉綠素含量明顯低于加拿大、澳大利亞等國(guó)。
